抗體(antibody)是指機體由于抗原的刺激而產(chǎn)生的具有保護作用的蛋白質。它(免疫球蛋白不僅僅只是抗體)是一種由漿細胞(效應B細胞)分泌,被免疫系統(tǒng)用來鑒別與中和外來物質如細菌、病毒等的大型Y形蛋白質,僅被發(fā)現(xiàn)存在于脊椎動物的血液等體液中,及其B細胞的細胞膜表面。抗體能識別特定外來物的重要特征,該外來目標被稱為抗原。
抗體是免疫蛋白質,在宿主對病毒、細菌和真菌等感染性病原體的防御中發(fā)揮著基本作用。這些Y型蛋白質的免疫功能是由其結合抗原的能力決定的,抗原是由細胞釋放的或在細胞上發(fā)現(xiàn)的刺激免疫反應的分子。
除了在宿主免疫中的作用,抗體在研究和治療方面也被證明是有價值的。兩種類型的抗體,多克隆抗體和單克隆抗體為研究人員提供了檢測或量化目標抗原的不同方法,主要是由于特異性和親和力的不同。
定義多克隆抗體和單克隆抗體有用性的兩個關鍵特征涉及它們各自對抗原的特異性和靈敏度。
抗體的特異性是由其結合域和目標抗原之間的相對親和力決定的,而其他分子是存在的。對這種特異性的利用對免疫學研究人員和臨床醫(yī)生來說是至關重要的,因為許多應用都是利用多克隆和/或單克隆抗體來專門檢測目標分子。結合抗原特異性,抗體的靈敏度是一個重要的參數(shù),決定了它在實驗室的實用性。
高靈敏度的抗體非常適用于診斷應用,如免疫沉淀、West Blot和酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA),因為它們能夠識別低水平的目標抗原。
單克隆抗體(monoclonal antibody, mAb):就是指由單一B細胞(其基因僅能編碼一種抗體)克隆產(chǎn)生的高度均一、僅針對某一特定抗原表位的抗體。
單克隆抗體是通過將抗原注入到宿主動物體內啟動機體免疫應答而產(chǎn)生的。因而制作單克隆抗體的大多數(shù)操作都是在體外將來自這些宿主的脾細胞與培養(yǎng)的惡性骨髓瘤細胞進行融合。將細胞克隆分離出來,融合步驟中存活下來的細胞稱為雜交瘤。雜交瘤因骨髓瘤特性而可以永生,且容易在培養(yǎng)物中繁殖。
多克隆抗體:用一種包含多種抗原決定簇的抗原免疫動物,可刺激機體多個B細胞克隆產(chǎn)生針對多種抗原表位的不同抗體。所獲得的免疫血清實際上是含有多種抗體的混合物。
多克隆抗體的第一步和單克隆抗體一樣,都是將免疫原注射到宿主體內產(chǎn)生免疫反應,激活了多種B細胞。不同的是免疫過后,多克隆抗體就直接從免疫宿主的血清中分離出來,或純化,沒有與骨髓瘤細胞融合的過程。一旦宿主動物死亡,需要免疫新的動物,這時血清中的抗體就會有所不同。
單克隆抗體與多克隆抗體之間的關鍵區(qū)別
屬性 | 單克隆抗體 | 多克隆抗體 |
抗體群體 | 同質性 | 異質性 |
結合特異性 | 識別目標抗原上的單一表位 | 識別目標抗原上的多個表位 |
靈敏度 | 蛋白質定量方面靈敏度高 | 對低數(shù)量的蛋白質有較高的靈敏度 |
交叉反應 | 特異性高,交叉反應低 | 存在生物物理多樣性,交叉反應高 |
生產(chǎn)成本 | 昂貴 | 低廉 |
來源 | 受刺激的B細胞的單系:雜交瘤 | 受刺激的B細胞的多個系別 |
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