Western Blot實驗是一種常用的生物化學實驗技術,用于檢測蛋白質在細胞或組織中的表達水平。這種實驗需要用到多種實驗室儀器,比如:離心機,電泳儀,轉膜儀,酶標儀,震蕩搖床等,下面將詳細介紹這些儀器及其在Western Blot實驗中的應用。
1. 電泳儀:電泳儀是Western Blot實驗中常用的儀器之一。它主要用于進行SDS-PAGE凝膠電泳,將蛋白質樣品分離成不同的組分。在電泳過程中,蛋白質樣品在電場的作用下,通過凝膠中的孔隙移動,根據(jù)分子大小和電荷的不同,實現(xiàn)蛋白質的分離。
天能系列轉移電泳槽-VE-586是一種用于對少量核酸和蛋白質樣品進行轉印的裝置。
該實驗室儀器裝置具有以下性能特點:
1. 開啟式轉移膠架:裝置采用創(chuàng)新設計的開啟式轉移膠架,可同時轉印四塊凝膠。這個設計使得操作更加方便快捷。
2. 電極架開孔設計:電泳產熱較少,條帶銳利。電極架采用特殊的開孔設計,能夠有效降低電泳產熱,保證轉印過程中的溫度控制,在轉印結果中獲得清晰而銳利的條帶。
3. 應用廣泛:該裝置適用于多種轉印技術,包括Westerlot、Northernlot、Southernlot等。它的多功能性使得它可以應用于不同領域的實驗需求。 此外,天能系列轉移電泳槽-VE-586還配備了EPS-200/EPS-300/EPS-600電泳儀電源等配套儀器,提供電泳實驗支持。蛋白電泳實驗中可以使用配用的預制膠,Tanon電泳Precast Gel天能SDS預制膠-Western blot是一種用于蛋白質分離的連續(xù)梯度聚丙烯酰胺變性電泳凝膠。 它具有以下特點:
a. 分離范圍廣:該預制膠適用于分離范圍為4-400 kDa的蛋白質樣品。無論是小分子量還是大分子量的蛋白質都可以通過該凝膠進行有效分離。
b.清晰銳利的條帶:這款預制膠采用了新型緩沖液配方,可以使得蛋白質電泳條帶更加清晰銳利。條帶的清晰度和解析度得到明顯提高,從而提高了實驗結果的準確性。
c. 穩(wěn)定性優(yōu)良:由于該預制膠的緩沖液配方經過優(yōu)化,能夠為蛋白質電泳提供穩(wěn)定的中性pH緩沖環(huán)境,有效避免了聚丙烯酰胺的水解現(xiàn)象,提高了凝膠的穩(wěn)定性。這種優(yōu)良的穩(wěn)定性能夠保證實驗的重復性和可靠性。
2. 轉膜儀:轉膜儀是Western Blot實驗中用于將凝膠中的蛋白質轉移到固相支持物(如硝酸纖維素膜或尼龍膜)上的儀器。轉膜過程中,蛋白質通過電場的作用,從凝膠中轉移到膜上,形成固相化的蛋白質印跡。這樣,就可以對蛋白質進行進一步的檢測和分析。
M-Blot快速轉膜儀是一款高效的蛋白快速轉膜系統(tǒng),它基于轉膜的原理,結合了傳統(tǒng)濕轉穩(wěn)定、均勻和半干轉快速、高效的特點,同時避免了傳統(tǒng)濕轉耗時費力和半干轉不均勻穩(wěn)定性差的缺點。 M-Blot快速轉膜儀能夠在10-15分鐘內快速高效地實現(xiàn)蛋白質從聚丙烯酰胺凝膠轉移到PVDF或NC膜上的過程。這個轉膜過程是非常重要的,因為它是將分離的蛋白質從凝膠中傳送到膜上,以進行后續(xù)的Western blot等分析。M-Blot轉膜儀通過優(yōu)化的轉膜液和平衡液的使用,確保了蛋白質的高效轉膜。 該儀器能夠實現(xiàn)轉膜的均一性和高效性。無論是蛋白質的大小或者含量,M-Blot轉膜儀都能夠提供較好的轉膜效果。它能夠同時轉移大小蛋白質,而且在轉膜過程中保持高效的轉移率。這意味著您可以獲得更加準確和可靠的轉膜結果。 另外,M-Blot快速轉膜儀的操作非常簡便,使得轉膜更加方便快捷。它具備穩(wěn)定性好、轉膜均勻、轉膜時間短等優(yōu)勢,為用戶提供了全新的轉膜體驗。不僅可以提高實驗效率,還可以減少實驗時間,為研究人員提供更多的時間進行其他實驗。
3. 搖床:搖床在Western Blot實驗中用于孵育和洗滌膜上的蛋白質。在孵育過程中,將膜放入含有特異性抗體的溶液中,通過搖床的搖動作用,使抗體與膜上的蛋白質充分接觸和反應。洗滌過程中,搖床則用于去除未結合的抗體和非特異性雜質,提高實驗的準確性。知楚ZHSY-50V水浴恒溫振蕩培養(yǎng)箱,采用進口伺服電機,故障率低,長使用壽命。采用的三維一體偏三輪驅動設計,不僅承載力強,同時也能保證平穩(wěn)而高效的運行。
4. 酶標儀:酶標儀是Western Blot實驗中用于檢測膜上蛋白質與抗體結合的儀器。酶標儀通過測量標記在抗體上的酶與底物反應產生的光信號,來定量檢測蛋白質的表達水平。這種儀器具有高靈敏度和高準確性,適用于大規(guī)模樣品檢測和分析。
FLUOstar Omega酶標儀是一款德國BMG Labtech公司生產的多功能酶標儀,具備紫外/可見光吸收光譜、熒光強度(包括FRET)、時間分辨熒光(包括DELFIA®)、TR-FRET(包括HTRF®和LanthaScreenTM)、AlphaScreen® / AlphaLISA®以及發(fā)光(包括快速發(fā)光和持續(xù)發(fā)光)等多個獨立檢測模塊。該酶標儀還特別支持BRET功能,能夠實現(xiàn)共振能量轉移檢測,為用戶提供高效而準確的檢測結果。
5. 離心機:離心機在Western Blot實驗中用于分離和純化蛋白質樣品。在離心過程中,蛋白質樣品在離心力的作用下,根據(jù)密度和沉降速度的不同,實現(xiàn)組分的分離。離心機對于去除樣品中的雜質和提取特定蛋白質具有重要作用。
這款恒爾2515離心機常用在各種分子生物學,蛋白質組學實驗中,它具有以下特點:
- 大轉子容量:可容納5個2.0ml離心管或6個15/25/50ml離心管。
-相對離心力:25155xg (15000rpm),可實現(xiàn)高速離心。
- 可適配16款不同轉子,提供更大的離心容量和多樣樣品適應性。
- 離心機上蓋采用快速鎖緊技術,方便快速開關蓋。
- 旋鈕加觸摸式調節(jié)參數(shù),操作簡便。
- 瞬時離心按鍵,能夠快速啟動離心過程。
- 軟剎車功能,可防止對敏感樣品的損害。
- 自動轉子失衡識別功能,提高離心安全性。
- 自動識別16款轉子并進行限速控制,保證離心過程的穩(wěn)定性。
- 可存儲8個常用程序,方便用戶快速調取。
- 2個記憶功能快捷程序按鍵,可快速調取常用程序。
- 緊急開蓋功能,適用于突發(fā)實驗事故,如斷電等情況。
- 提供三種定時功能:定時開啟、定時關閉和計時。
- 門鎖開關狀態(tài)顯示及糾錯功能,提供報警及停機功能。
- 可通過10檔加減速度曲線控制離心過程。
- 溫度范圍為-20°C至40°C,可適應不同的離心需要。
- 持續(xù)制冷功能,離心結束后仍可保持設定溫度。
- 快速預冷功能,可快速預冷離心腔體。
- 自動待機功能,可選1、2、4或8小時,在停止使用后自動進入待機模式,降低能耗,延長壓縮機使用壽命。
- 內置冷凝水槽,避免冷凝水積聚,防止腐蝕。
除了以上幾種主要儀器外,Western Blot實驗還可能用到其他一些輔助設備,如微量移液器、水浴鍋、冰箱等。這些實驗室儀器設備在實驗過程中起著重要 作用,為實驗的順利進行提供了有力保障。